Nhận dạng ngân hàng tế bào Vero 76 qua các đời cấy chuyền bằng phương pháp giải trình tự gen đích psi beta and delta globin loài thận khỉ xanh Châu Phi (Cercopithecus aethiops)

Tóm tắt

Đặt vấn đề/ Mục tiêu: Ngân hàng tế bào Vero 76 gốc giống (Master Cell Bank) và ngân
hàng tế bào Vero 76 làm việc (Working Cell Bank) được nhận dạng đặc hiệu qua các đời
cấy chuyền bằng phương pháp giải trình tự gen đích psi beta and delta globin của dòng tế
bào vero 76 thận khỉ xanh Châu phi (Cercopithecus aethiops) để nhận dạng và đánh giá s
ổn định về di truyền của ngân hàng tế bào Vero 76 gốc giống (MCB) và ngân hàng tế bào
làm việc (WCB) được cấy chuyền nhiều lần trên môi trường nuôi cấy.
Phương pháp: Ngân hàng tế bào Vero 76 (MCB, WCB) được thu nhận, tách chiết và tinh
sạch DNA tổng số bằng bộ kit GeneJET gel extraction kit – Thermo Fisher Scientific, Mỹ.
Sản phẩm DNA tổng số được kiểm tra độ tinh sạch bằng phương pháp điện di trên gel
agarrose 0.8%.
Kết quả: Kết quả giải trình tự và so sánh để xác định các điểm sai khác giữa các mẫu tế bào ở
các thế hệ cấy chuyển so với dòng tế bào gốc ban đầu trên ngân hàng dữ liệu Gen bank
(NCBI). Kết quả đánh giá cho thấy các dòng tế bào ở các thế hệ cấy chuyền không có sự khác
biệt nhau và so với dòng tế bào gốc, điều này khẳng định có s ổn định về mặt di truyền của
các dòng tế bào trong quá trình cấy chuyển thiết lập ngân hàng.
Kết luận: Chúng tôi đã thành công trong việc thiết kế mồi đặc hiệu (Primer) để khuếch đại và
giải trình tự vùng gen psi beta và delta globin của loài trên các dòng tế bào Vero76 được cấy
chuyển nhiều lần. Kết quả phân tích trình tự cho thấy trình tự của các dòng tế bào ở ế ế tcế cệ
không có sự thay đổi chứng tỏ các dòng tế bào là hoàn toàn ổn định về di truyền sau nhiều lần
cấy truyền. Kết quả nghiên cứu cũng cho thấy có thể sử dụng phương pháp giải trình tự vùng gen
psi beta và delta globin đặc hiệu của loài thận khỉ xanh châu phi (Cercopithecus aethiops) trong
việc nhận dạng đặc hiệu các dòng tế bào Vero76.