TỐI ƯU KỸ THUẬT SDS-PAGE VÀ WESTERN BLOT CHO NHẬN DẠNG ERYTHROPOIETIN TRONG SẢN PHẨM CÔNG NGHỆ CAO SINH HỌC

Tóm tắt

Erythropoietin (EPO) là yếu tố kích thích tạo hồng cầu được sản xuất bằng công nghệ tái tổ hợp DNA, sử dụng trong điều trị các bệnh thiếu máu. Thử nghiệm nhận dạng bằng điện di trên sodium dodecyl-sulfate polyacrylamide gel (SDS-PAGE) và Western Blot là thử nghiệm quan trọng trong kiểm định chất lượng sinh phẩm chứa EPO. Tại Viện Kiểm định Vắc xin và Sinh phẩm y tế (NICVB), nhóm nghiên cứu đã thiết lập quy trình nhận dạng EPO bằng kỹ thuật SDS-PAGE và Western Blot trên hai loại sinh phẩm chứa epoietin alpha. Đồng thời, cũng thực hiện lựa chọn hiệu giá kháng thể thứ nhất và kháng thể thứ hai tối ưu cho thử nghiệm lai màng nitrocellose trên hai độ pha loãng 1:500 và 1:800. Bên cạnh đó, nhóm nghiên cứu đã sử dụng 3,3',5,5'- Tetramethylbenzidine (TMB) của Invitrogen trong phản ứng phát hiện phức hợp kháng nguyên kháng thể. Kết quả cho thấy sử dụng TMB làm cơ chất phát hiện phức hợp kháng nguyên kháng thể nhanh, thuận tiện và hiệu quả. Kết quả nghiên cứu là cơ sở triển khai SDS-PAGE và Western Blot nhận dạng EPO trong sản phẩm công nghệ cao sinh học tại NICVB